
簡要描述:原位雜交染色(DAB)
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石蠟切片 / 冰凍切片
脫蠟→水化→蛋白酶 K 消化→暴露核酸
預(yù)雜交封閉非特異性位點
加入地gao辛(DIG)標(biāo)記探針
恒溫雜交(根據(jù)探針 Tm 值優(yōu)化)
抗 - DIG-HRP 酶標(biāo)抗體結(jié)合
DAB 顯色:陽性信號 = 棕黃色顆粒
蘇木素復(fù)染細(xì)胞核(藍色)
ImageJ 計數(shù)陽性面積 / 光密度值
陽性表達:細(xì)胞質(zhì) / 細(xì)胞核出現(xiàn)棕褐色顆粒
細(xì)胞核:藍色(蘇木素)
背景:淺黃色或無色
肺纖維化、哮喘、糖尿病腎病、腦梗、腫瘤
檢測:TGF-β、Col1a1、α-SMA、炎癥因子、miRNA等
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