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細(xì)胞周期檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述：細(xì)胞周期是指細(xì)胞從一次分裂完成開(kāi)始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開(kāi)細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。

  • 更新時(shí)間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
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詳細(xì)介紹

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一、實(shí)驗(yàn)原理

用 **PI（碘化丙啶）** 嵌入 DNA 雙鏈，熒光強(qiáng)度與 DNA 含量成正比，根據(jù) DNA 含量將細(xì)胞分為：

  • G0/G1 期：二倍體，2N

  • S 期：DNA 復(fù)制期

  • G2/M 期：四倍體，4N

二、主要試劑

  • PI 染色液（含 RNase A）

  • 70% 乙醇（-20℃預(yù)冷）

  • PBS

  • 流式細(xì)胞儀

三、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)步驟（可直接照做）

1. 細(xì)胞收集

  • 棄培養(yǎng)基，PBS 洗 1 次

  • yi酶消化，終止，吹打成單細(xì)胞懸液

  • 離心：1000 rpm × 5 min，棄上清

2. 固定（關(guān)鍵）

  • 緩慢加入 **-20℃預(yù)冷 70% 乙醇 **

  • 邊加邊輕輕吹打，防止成團(tuán)

  • 4℃固定過(guò)夜（最少 2 h）

3. 洗滌去乙醇

  • 離心棄乙醇

  • PBS 重懸洗滌 1～2 次

4. PI 染色

  • 棄上清，加入PI 染液（含 RNase）

  • 37℃避光孵育 30 min

5. 上機(jī)檢測(cè)

  • 流式上機(jī)，F(xiàn)L2 通道收集信號(hào)

  • FlowJo / 配套軟件分析周期各期比例


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