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pcr實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

簡要描述:PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的天然復(fù)制過程,在體外擴(kuò)增DNA分子的一種分子生物學(xué)技術(shù),主要用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段。在待擴(kuò)增的DNA片段兩側(cè)和與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩個(gè)寡核苷酸引物,經(jīng)變性、復(fù)性和延伸若干個(gè)循環(huán)后,DNA擴(kuò)增2?倍。

  • 更新時(shí)間:2026-03-20
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 訪  問  量:874

詳細(xì)介紹

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科研實(shí)驗(yàn)服務(wù)

1. 基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

一、實(shí)驗(yàn)總流程

  1. 提取總 RNA(組織 / 細(xì)胞)

  2. 測濃度 & 純度(Nanodrop)

  3. 反轉(zhuǎn)錄(cDNA 合成)

  4. qPCR 擴(kuò)增

  5. 數(shù)據(jù)分析(2^-ΔΔCt 法)


二、RNA 提?。ㄗ铌P(guān)鍵一步)

  1. 細(xì)胞 / 組織加入 Trizol,充分裂解

  2. 加氯仿,混勻,離心取上層水相

  3. 加異丙醇沉淀 RNA,離心棄上清

  4. 75% 乙醇洗滌,晾干

  5. 無酶水溶解

  6. 檢測:

    • A260/280:1.8–2.1 合格

    • 無基因組污染


三、反轉(zhuǎn)錄(RT)

相同質(zhì)量 RNA(如 1 μg)
加反轉(zhuǎn)錄試劑盒體系:
  • RNA

  • 5×Buffer

  • dNTP

  • 隨機(jī)引物 / Oligo dT

  • 反轉(zhuǎn)錄酶

  • 無酶水

條件:
  • 37℃ 15 min

  • 85℃ 5 s 滅活酶

    得到 cDNA,-20℃保存。



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