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Von Kossa染色

簡(jiǎn)要描述：Von Kossa染色是一種用于檢測(cè)組織中鈣鹽的經(jīng)典方法，特別適用于礦化結(jié)節(jié)的染色。在染色過(guò)程中，首先將礦化基質(zhì)中的磷酸鹽和碳酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿徙y和碳酸銀，然后通過(guò)使用日光、紫外線或強(qiáng)還原劑，如甲醛，將這些銀鹽還原為黑色的金屬銀。這種反應(yīng)使得鈣鹽沉積的區(qū)域在染色過(guò)程中呈現(xiàn)黑色或棕黑色，而細(xì)胞核則呈藍(lán)色，背景則呈紅色。

  • 更新時(shí)間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
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詳細(xì)介紹

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一、原理

銀離子（Ag?）與組織中的磷酸鈣 / 碳酸鈣發(fā)生置換反應(yīng)，生成磷酸銀 / 碳酸銀，經(jīng)光照或還原劑顯影后形成棕黑色沉淀。

二、適用樣本

  • 細(xì)胞鈣化染色（鈣化 VSMC、成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)）

  • 組織切片：腎、血管、心臟ban膜、骨、軟骨、腫瘤

三、試劑配制（常用）

  1. 5% 硝suan銀溶液（避光現(xiàn)配）

  2. 5% 硫代硫suan鈉（定影液）

  3. 核固紅 / 中性紅（復(fù)染細(xì)胞核，可選）

四、細(xì)胞爬片 Von Kossa 染色步驟

  1. 細(xì)胞爬片用4% 多聚甲醛固定 15 min

  2. PBS 輕洗 2 次

  3. 滴加 5% AgNO? 完quan覆蓋樣本

  4. 紫外照射 / 強(qiáng)光照射 15–30 min（出現(xiàn)黑色即可）

  5. 去離子水洗去多余銀液

  6. 5% 硫代硫suan鈉處理 2 min 定影

  7. 流水沖洗，核固紅復(fù)染 5 min（可選）

  8. 水洗、脫水、透明、封片

  9. 鏡檢：鈣沉積呈黑色 / 棕黑色

五、石蠟組織切片 Von Kossa 步驟

  1. 脫蠟至水：二甲苯→梯度酒精→水

  2. 蒸餾水漂洗

  3. 5% 硝suan銀避光浸染 30–60 min

  4. 紫外 / 強(qiáng)光顯色至出現(xiàn)黑色

  5. 蒸餾水洗滌

  6. 5% 硫代硫suan鈉定影 2–3 min

  7. 流水沖洗 5 min

  8. 核固紅復(fù)染細(xì)胞核（淡紅色）

  9. 脫水透明封片


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