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transwell轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述：原理:常用8.0um，12.0um膜，上室種腫瘤細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細(xì)胞會(huì)向營(yíng)養(yǎng)成分高的下室跑，計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。

  • 更新時(shí)間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
  • 訪  問  量：1325

詳細(xì)介紹

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一、基本原理

  • Transwell 小室：上層 + 下層，中間有多孔濾膜（8 μm 常用）

  • 遷移實(shí)驗(yàn)（Migration）：細(xì)胞主動(dòng)穿過膜孔，從上層到下層

  • 侵襲實(shí)驗(yàn)（Invasion）：膜上包被Matrigel，模擬細(xì)胞穿過基底膜

  • 染色后計(jì)數(shù)穿膜細(xì)胞，反映轉(zhuǎn)移能力

二、核心材料

  • Transwell 小室（24 孔板，8 μm 孔徑）

  • Matrigel（僅侵襲實(shí)驗(yàn)用）

  • 無血清培養(yǎng)基

  • 含血清培養(yǎng)基（下室趨化）

  • 甲醇 / 多聚甲醛固定

  • 結(jié)晶紫染色

三、實(shí)驗(yàn)步驟（通用標(biāo)準(zhǔn)流程）

1. 鋪膠（僅侵襲實(shí)驗(yàn)）

  • Matrigel 用無血清培養(yǎng)基1:8 稀釋

  • 每孔上層加 50 μL

  • 37℃ 孵育 2–4 h 或過夜 使其凝固

2. 細(xì)胞處理

  • 胰mei消化，無血清培養(yǎng)基重懸

  • 計(jì)數(shù)，調(diào)整濃度：1×10? 細(xì)胞 / 孔 左右

3. 加樣

  • 上室：200 μL 細(xì)胞懸液（無血清）

  • 下室：600 μL 含 10% FBS 培養(yǎng)基（趨化）

4. 培養(yǎng)

  • 37℃ 培養(yǎng)

    • 遷移：12–24 h

    • 侵襲：24–48 h

5. 固定與染色

  • 取出小室，PBS 輕洗

  • 甲醇固定 15 min

  • 0.1% 結(jié)晶紫染色 15–20 min

  • 棉簽輕輕擦掉上室未穿膜細(xì)胞

6. 拍照計(jì)數(shù)

  • 隨機(jī)取 5 個(gè)視野（×100 或 ×200）

  • ImageJ 計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)，計(jì)算平均值

四、結(jié)果判斷

  • 穿膜細(xì)胞越多 → 遷移 / 侵襲能力越強(qiáng)

  • 給藥組 vs 模型組：細(xì)胞數(shù)顯著減少 → 抑制轉(zhuǎn)移


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