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軟瓊脂克隆形成服務

簡要描述：軟瓊脂克隆形成服務:克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

更新時間：2026-03-20
廠商性質：代理商
訪問量：1317

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實驗技術服務

動物實驗動物模型構建其他課題整體外包生化檢測動物實驗技術服務免疫學檢測技術服務神經元原代培養(yǎng) 細胞實驗服務動物模型構建技術服務分子實驗技術服務病理檢測技術服務蛋白質組學技術服務代謝組學技術服務

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一、原理

兩層瓊脂體系：

底層瓊脂：起支撐作用
上層瓊脂：細胞懸浮其中，無法貼壁
只有惡性程度高 / 腫瘤干細胞樣的細胞能在懸浮狀態(tài)下增殖形成肉眼可見的克隆。

二、材料

2× 培養(yǎng)基（含 20% FBS）
1.2% 低熔點瓊脂糖（底層）
0.7% 低熔點瓊脂糖（上層）
6 孔板

三、標準步驟（常用體系）

1. 鋪底層膠

1.2% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合（終濃度 0.6%）
每孔加 2 mL，室溫凝固

2. 鋪上層膠（含細胞）

0.7% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合（終濃度 0.35%）
加入細胞懸液，混勻
細胞密度：1×103~1×10? / 孔
每孔加 1~1.5 mL，室溫凝固

3. 培養(yǎng)

37℃、5% CO? 培養(yǎng) 14~21 天
每 3～4 天滴加少量培養(yǎng)基保濕

4. 染色與計數

PBS 輕洗
結晶紫或 MTT 染色
顯微鏡下計數直徑＞50~100 μm的克隆數

四、結果判斷

克隆數越多、體積越大 → 惡性程度 / 成瘤能力越強
給藥組克隆數減少 → 抑制惡性表型

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1. 鋪底層膠

2. 鋪上層膠（含細胞）

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