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流式檢測實驗服務(wù)

簡要描述：流式檢測實驗服務(wù)是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，Jc-1聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時Jc-1為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。

  • 更新時間：2026-03-20
  • 廠商性質(zhì)：代理商
  • 訪  問  量：1348

詳細(xì)介紹

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一、細(xì)胞周期檢測（PI 單染）

  • 原理：PI 嵌入 DNA，熒光強度反映 DNA 含量，分 G0/G1、S、G2/M 期

  • 用途：藥物對細(xì)胞增殖、周期阻滯的影響

簡要步驟

  1. 細(xì)胞消化、70% 乙醇 4℃ 固定過夜

  2. PBS 洗，加 RNase A 37℃孵育

  3. 加 PI 染色，避光 30min

  4. 上機(jī)檢測，Modfit 或 FlowJo 分析周期分布

論文寫法
細(xì)胞經(jīng)不同處理后，70% 冰乙醇固定，RNase 消化后 PI 染色，流式細(xì)胞儀檢測 DNA 含量，分析細(xì)胞周期各時期分布比例。

二、細(xì)胞凋亡檢測（Annexin V-FITC/PI 雙染）

  • 原理：凋亡早期膜外翻結(jié)合 Annexin V，晚期壞死 PI 入核

  • 結(jié)果：Q3 正常，Q4 早期凋亡，Q2 晚期凋亡 / 壞死

步驟

  1. 收集細(xì)胞（上清 + 貼壁一起收）

  2. Binding buffer 重懸

  3. 加 Annexin V 和 PI，避光 15min

  4. 上機(jī)，1h 內(nèi)完成

論文寫法
采用 Annexin V-FITC/PI 雙染法檢測細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀分析早期凋亡率與總凋亡率。

三、ROS 活性氧檢測

  • 探針：DCFH-DA

  • 熒光：綠色熒光強度 ∝ ROS 水平

步驟

  1. 細(xì)胞加 DCFH-DA，37℃ 孵育 20–30min

  2. 洗細(xì)胞，流式上機(jī)測綠色熒光

論文寫法
以 DCFH-DA 為熒光探針檢測細(xì)胞內(nèi) ROS 水平，流式細(xì)胞儀測定平均熒光強度以反映 ROS 相對含量。

四、線粒體膜電位（MMP）

  • 探針：JC-1

  • 紅綠熒光比：紅色↓、綠色↑ → 膜電位下降（凋亡相關(guān)）

論文寫法
采用 JC-1 染色檢測線粒體膜電位，流式分析紅綠熒光比值變化。

五、細(xì)胞表面標(biāo)志物 / 蛋白表達(dá)

如：CD44、CD133、Nestin、Ki67、α-SMA、緊密連接蛋白等

  • 一抗直接 / 間接標(biāo)記熒光

  • 設(shè)同型對照

論文寫法
細(xì)胞經(jīng)固定破膜（或活細(xì)胞）后，熒光標(biāo)記抗體避光染色，流式檢測陽性細(xì)胞比例及平均熒光強度。

六、鈣離子濃度（Ca2?）

探針：Fluo-3/AM、Fura-2
多用于神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞


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