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WGA熒光染色技術服務

簡要描述：麥胚凝集素(WGA)是從谷物中提取出來，可以特異性的結合心肌細胞膜上的一種糖蛋白，二者結合起來可以將心肌細胞膜染出來。WGA可以把心肌細胞膜染出來，這樣是否肥大的細胞從圖像與正常組的對比就可以看出，也可以用專門的軟件對染出的細胞進行直徑、面積等的測量，能夠分析心肌細胞是否肥大。

  • 更新時間：2026-03-20
  • 廠商性質：代理商
  • 訪  問  量：2467

詳細介紹

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一、原理

  • WGA 是植物凝集素，特異性結合細胞膜糖蛋白 / 糖脂上的 N - 乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）與唾液酸殘基。

  • 熒光標記 WGA（如Alexa Fluor 488/555/647、FITC、Cy5.5）結合后，在對應激發(fā)光下發(fā)出熒光，清晰勾勒細胞膜輪廓。

  • 關鍵：不做透化→僅染細胞膜；做透化→可染高爾基體、糖基化蛋白。

二、標準染色結果

  • 細胞膜 / 糖萼 / 基底膜 / 幾丁質：熒光色（依標記染料）

    • FITC/Alexa 488：綠色（Ex 488 nm / Em 519 nm）

    • Alexa 555/Cy3：紅色（Ex 555 nm / Em 565 nm）

    • Alexa 647/Cy5.5：遠紅 / 近紅外（Ex 647 nm / Em 668 nm）

  • 細胞核：藍色（DAPI 復染，Ex 358 nm / Em 461 nm）

  • 背景：極低熒光

三、適用樣本

  • 活細胞、固定細胞爬片

  • 石蠟 / 冰凍組織切片（肝、腎、肺、心肌、皮膚、神經）

  • 類器官、3D 培養(yǎng)

  • 真菌（幾丁質）、革蘭氏陽性菌、酵母

四、核心用途

  1. 細胞膜輪廓標記：細胞形態(tài)、肥大 / wei縮、遷移、共定位

  2. 基底膜 / 糖萼：腎、肺、血管、腫瘤間質糖基化

  3. 纖維化：與天狼猩紅 / Masson 共染，定位膠原與膜結構

  4. 微生物：真菌細胞壁、細菌膜、酵母出芽疤痕

  5. 神經科學：順行 / 逆行示蹤、突觸標記

五、通用步驟（細胞 + 組織）

1. 樣本前處理

  • 活細胞：PBS 洗 2 次，直接染色（不固定、不透化）

  • 固定細胞：4% 多聚甲醛固定 15–20 min，PBS 洗，不透化

  • 石蠟切片：脫蠟→梯度酒精→水→抗原修復（EDTA pH8.0，可選）→PBS 洗

2. 染色（避光）

  • 工作濃度：5–10 μg/mL（熒光 WGA 溶于 PBS）

  • 孵育：室溫 / 37℃ 10–30 min（活細胞≤20 min，防毒性）

3. 洗滌與復染

  • PBS 洗 3×5 min，去未結合 WGA

  • DAPI（1 μg/mL）復染核：室溫避光 5–10 min，PBS 洗

4. 封片與觀察

  • 抗熒光淬滅封片劑封片

  • 熒光 / 共聚焦顯微鏡，按染料選激發(fā) / 發(fā)射通道


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