細(xì)胞原位雜交技術(shù)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述：原位雜交實(shí)驗(yàn)將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱(chēng)為原位雜交。用原位雜交技術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水平來(lái)探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。細(xì)胞原位雜交技術(shù)服務(wù)已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。

更新時(shí)間：2026-03-20
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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟:前期胚胎的制備。

原位雜交**天進(jìn)行重新水化和固定、預(yù)雜交、雜交。

原位雜交第二天進(jìn)行1將探針回收，放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)2加入50%甲酰按/2XSSCT溶液1量升，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。3署換2XSSCT1ml，60°℃，放置15分鐘。4詈換0.2XsSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。5用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動(dòng)。6室溫下加1ml 1:2:7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。7 按1:3000的比例在1∶2:7溶液中加入酶連**抗體，40冰箱過(guò)夜。

原位雜交第三天進(jìn)行1)用1ml含10%熱滅**清的MABT溶液置換抗體溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mIMABT置換，25分鐘，再用1mIMABT溶液詈換，一小時(shí)以上，后用1mIMABT溶液置換，25分鐘。2用1ml 1mM米勝的Staining buffer洗一次，每次放置五分鐘。3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去stainingbuffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM米唑)，十六孔板外面包,上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色5)將顯色的胚胎中的底物吸出，用

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