國(guó)自然課題實(shí)驗(yàn)外包

1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

• 品系：如 C57BL/6 小鼠、SD 大鼠、裸鼠等

• 性別、周齡、體重

• 飼養(yǎng)環(huán)境：SPF 級(jí)，溫度 22±2℃，12 h 明暗循環(huán)，自由攝食飲水

• 適應(yīng)性飼養(yǎng) 3–7 天

2. 實(shí)驗(yàn)分組（通用模板）

1. 正常對(duì)照組（Control）

2. 模型組（Model）

3. 低劑量給藥組

4. 中劑量給藥組

5. 高劑量給藥組

6. 陽(yáng)性藥對(duì)照組（如陽(yáng)性藥物、溶劑對(duì)照）

3. 動(dòng)物模型構(gòu)建

• 腫瘤：皮下荷瘤、原位移植瘤、轉(zhuǎn)移模型

• 代謝：糖尿病、肥胖、脂肪肝

• 心血管：心梗、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓

• 神經(jīng)：MCAO 腦缺血、阿爾茨海默、帕金森

• 肝腎損傷：肝纖維化、腎纖維化、急性腎損傷

• 炎癥免疫：關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎、肺炎

4. 給藥方式與周期

• 給藥途徑：灌胃（ig）、腹腔注射（ip）、尾靜脈（iv）、皮下（sc）

• 給藥劑量、體積、頻率：如每日 1 次，連續(xù) 2/4/6 周

• 觀察指標(biāo)：體重、飲食、一般狀態(tài)、腫瘤體積、行為學(xué)等

5. 標(biāo)本采集

1. 稱重、麻醉

2. 腹主動(dòng)脈 / 心臟采血

3. 分離血清，用于生化、ELISA、炎癥因子

4. 摘取靶器官：心、肝、脾、肺、腎、腦、腫瘤、肌肉等

5. 器官稱重，計(jì)算臟器指數(shù)

6. 一部分組織4% 多聚甲醛固定→石蠟包埋

7. 一部分組織液氮速凍→-80℃ 保存，用于 WB、qPCR、ELISA

6. 體內(nèi)檢測(cè)指標(biāo)（常用全套）

（1）血清生化 / ELISA

• 肝功能：ALT、AST

• 腎功能：BUN、Cr

• 血脂：TC、TG、LDL-C、HDL-C

• 炎癥因子：TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10

• 氧化應(yīng)激：SOD、MDA、GSH-Px

（2）組織病理學(xué)

• HE 染色：組織形態(tài)、壞死、炎癥浸潤(rùn)

• Masson / 天狼猩紅：纖維化

• PAS：糖原、基底膜

• 尼氏染色 / TTC：神經(jīng)、腦梗死

• 免疫組化 IHC：蛋白定位與表達(dá)

（3）分子生物學(xué)

• 組織 qPCR：mRNA 水平

• 組織 Western blot：蛋白水平

• 免疫熒光 / 免疫組化：定位

（4）腫瘤模型

• 腫瘤體積、重量、抑瘤率

• 肺 / 肝轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)計(jì)數(shù)

• Ki-67（增殖）、TUNEL（凋亡）

7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

• 數(shù)據(jù)以 mean ± SD 表示

• 兩組比較：t 檢驗(yàn)

• 多組比較：單因素方差分析 ANOVA + 事后檢驗(yàn)

• P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義