chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

簡要描述：chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
研究蛋白質(zhì)和DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑

更新時(shí)間：2026-03-22
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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

作為自然科學(xué)的重要分支，生物整體科研涵蓋基礎(chǔ)生物研究與應(yīng)用生物研究兩大板塊，核心使命是揭示生命本質(zhì)、調(diào)控生命活動(dòng)、改造自然，其研究成果廣泛滲透到醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、能源等多個(gè)領(lǐng)域，尤其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，為疾病機(jī)制研究、新型診療技術(shù)研發(fā)、藥物創(chuàng)新等提供了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支撐，是連接基礎(chǔ)生物研究與臨床醫(yī)療實(shí)踐的關(guān)鍵橋梁。
1 、樣品準(zhǔn)備與交聯(lián)
細(xì)胞收集后，用37%的formaldehyde處理細(xì)胞，交聯(lián)核酸與DNA結(jié)合蛋白；
2. 超聲打斷染色質(zhì)
裂解細(xì)胞，用Bioruptor將染色質(zhì)超聲破碎成200－1000bp片斷；將片段分為兩份，一份用于免疫共沉淀，一份用于對照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結(jié)合進(jìn)行免疫共沉淀，利用免疫磁珠法富集抗體復(fù)合物。
4 、解交聯(lián)及純化 DNA
將富集的DNA/蛋白復(fù)合物解交聯(lián)釋放DNA的片段，并進(jìn)行純化（IP DNA）；B步驟所得用于對照（Input DNA）的片斷作不進(jìn)行IP實(shí)驗(yàn)，但也要解交聯(lián)并純化。
5 、 DNA 段 PCR 擴(kuò)增
針對ChIP DNA, Input DNA及對照DNA的目的片段設(shè)計(jì)特異性引物并進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增。
6 、結(jié)果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]

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