細胞平板克隆形成實驗

細胞平板克隆形成實驗步驟

1、細胞懸液制備:取對數生*的單層培養(yǎng)細胞，用0. 25%蛋白酶消化并吹打成單個細胞，離后用*培養(yǎng)基重懸,制成細胞懸液。

2、細胞種板:將細胞懸液作梯度倍數稀釋，以每皿50、100、 200、 500、1000、 2000個細胞的梯度密度分別接種含1 ml 37 C預熱培養(yǎng)液的皿中，并輕輕轉動，使細胞分散均勻。置37 C 5% Co2的環(huán)境下，靜置培養(yǎng)。

3、細胞觀察:顯微鏡下觀察到單個細胞長到20個以上細胞克隆，培養(yǎng)皿中出現肉眼可見的克隆時，終止培養(yǎng)。棄去.上清液，用PBS小心浸洗2次。加純甲醇1ml,固定15分鐘。然后去固定液,加適量Giemsa應用染色液染10分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥，手記拍照采集圖像。

4、克隆計數:用肉眼直接計數克隆數，后計算克隆形成率。

細胞平板克隆形成實驗結果分析

作為自然科學的重要分支，生物整體科研涵蓋基礎生物研究與應用生物研究兩大板塊，核心使命是揭示生命本質、調控生命活動、改造自然，其研究成果廣泛滲透到醫(yī)學、農業(yè)、環(huán)保、能源等多個領域，尤其在醫(yī)學領域，為疾病機制研究、新型診療技術研發(fā)、藥物創(chuàng)新等提供了堅實的理論基礎和技術支撐，是連接基礎生物研究與臨床醫(yī)療實踐的關鍵橋梁。