10-12周齡雌性大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的原代培養(yǎng)

大鼠卵巢顆粒細(xì)胞是卵巢卵泡內(nèi)的主要功能細(xì)胞，圍繞卵母細(xì)胞分布，具有分泌雌激素、孕激素、抑制素等激素的功能，參與卵泡發(fā)育、成熟及排卵的調(diào)控過(guò)程，是研究卵巢生理功能、生殖內(nèi)分泌調(diào)控、卵巢相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制及藥物篩選的理想細(xì)胞模型。大鼠卵巢顆粒細(xì)胞原代培養(yǎng)的核心原理是：通過(guò)無(wú)菌操作獲取大鼠卵巢組織，分離卵泡并剝離顆粒細(xì)胞，采用酶解結(jié)合機(jī)械吹打的方式分散細(xì)胞，經(jīng)離心洗滌、過(guò)濾純化去除雜質(zhì)及死細(xì)胞，將純化后的活細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶/皿中，在適宜的營(yíng)養(yǎng)條件和培養(yǎng)環(huán)境下，使細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)、增殖，獲得純度高、活性好的原代卵巢顆粒細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)是直接從機(jī)體取得細(xì)胞、組織進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)，卵巢顆粒細(xì)胞作為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，培養(yǎng)關(guān)鍵在于全程無(wú)菌操作、精準(zhǔn)控制酶解條件，減少細(xì)胞損傷，優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境，確保細(xì)胞貼壁率和活力，避免污染、細(xì)胞聚集或脫壁。